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Fluorescence Filter System 

顯微鏡螢光濾鏡

我們因應您的螢光應用, 提供最佳螢光觀察與取像的解決方法. 螢光技術的確是一門專業技術, 洽當的規劃, 往往讓您事半功倍.

美嘉儀器公司的專業團隊, 在螢光影像的觀察及影像擷取, 都有多年的豐富經驗, 可以提供螢光濾鏡及螢光影像系統, 供所有廠牌顯微鏡使用 ( Leica, Zeiss, Nikon, Olympus ) 歡迎您的洽詢.

 

 
顯微鏡螢光技術 ( Fluorescence Microscopy )

激發光源 ( Excitation sources )
一般顯微鏡都採用汞燈 50 W, 或 100 W, 也有使用 Xenon 燈源 75W, 125W, 175W, 250W. 此外, 我們也經常使用先進的的激發光源, 以利波長選擇, 及, 調整激發光波的強度, 以利螢光染劑及樣品的長時間應用. 例如 :
Leica EL 6000 外接式光纖傳導螢光光源  : 光纖傳導, 鐵氘燈源.
單光儀 ( Monochromator ), 提供單一波長, 連續掃描, 切換波長.
超高速波長切換裝置 ( Galvanometer-driven wavelength switcher, Sutter DG4 ), 高速切換波長.
冷卻式二極體光源 ( CoolLED Light source ) : 二極體光源, 可快速切換或開關, 無須附加快門及減光濾鏡.
雷射光源 ( Laser ), 提供單一波長, 光照品質優.
調控強度可使用 ND filter 或 AOTF ( Acousto optical tunable filter ).
此外, 輔以規劃快門 ( Shutter ) 設計, 便能控制光照時間.
Sutter Lambda-10 Monochromator Sutter DG4 Laser system

上圖 : 藍色: 激發光譜, 綠色 : 分光, 紅色 : 螢光釋放光譜 ( 取自 Chroma / USA )

 

有效的激發, 分光, 及 光譜鑑別蒐集, 是必須依賴您的樣品及螢光染劑而決定之. 如上圖, 左邊圖示, 因為 Emission filter 的設計欠佳, 以致產生螢光重疊雜訊. 右圖圖示, 表示適當正確的 Emission filter 規劃, 產生紅綠光譜分離的影像.
 

活體螢光蛋白 ( Living color protein ) 的光譜都極為接近, 在使用上, 要謹慎處理選擇濾鏡波長的規劃. 取自 Clontech.

螢光濾鏡 ( Fluorescence Filter )

每一組螢光濾鏡基本上都包括了三個鏡片 

1). 激發光濾鏡 ( Excitation Filter )

因為特定的染劑需要使用特定波長範圍的光來當作激發光源 ( 才不致影響到其它不想要檢視的物質被激發 ) 而一般燈泡式的光源 ( Hg 50W, Hg 100W, Xe 75 W ), 所產生的光, 都含蓋全波長 ( 300 – 1200 nm ) , 所以, 必須使用激發光濾鏡來篩選激發螢光染劑所須的光譜範圍 ( 可為 Long-pass, Band-pass, Short-pass ). 激發光濾鏡是以特殊的鍍膜, 來產生可篩選波長的功能. 例如 BP 450 – 490 nm, 即是僅讓 450 – 490 nm 間的光通過, 用以激發 FITC 染劑.  

2). 分光鏡 ( Dichromatic Mirror Beam Splitter )

將較短波長的激發光反射至樣品. 例如 RKP 510 nm, 即是, 510 nm 以下的光反射至樣品, 然而, 510 nm 以上的光可通過

3). 釋放光濾鏡 ( Emission Filter 或者 Suppression Filter, Barrier filter ) 受檢樣品中的特定染劑及其它物質被激發後, 所有被激發的物質都釋放出來較長波長的螢光, 然而螢光僅能在釋放光濾鏡所選定的特定波長範圍內通過, 此通過的螢光即是我們所要觀察的螢光影像. 例如 : LP 510 nm, 即是, 螢光光譜超過 510 nm , 都能通過濾鏡供觀察, 低於 510 nm 的螢光則被阻擋看不到.

目前, 全世界只有 Leica TCS Confocal Spectral Microscope 能將此三個關鍵技術突破為完全微電腦控制的連續可調, 這是顯微鏡專家的夢想, 今日, 已成真.   詳細請參考 Leica TCS 系列共軛焦顯微鏡.
Leica 螢光濾鏡表  ( 訂購時, 請告知 Leica 顯微鏡機型 或 Filter wheel 機型 )

( 如需其他特定濾鏡, 或, 特定用途, 或, 使用於其他廠牌顯微鏡上, 請洽本公司技術人員 )

Filter Cube Excitation Range Excitation Filter Dichromatic Mirror Suppression Filter
A UV BP340-380 400 LP 425
A4 UV BP 360/40 400 BP 470/40
Analyzer cube - - - Analyzer
BFP/GFP UV/blue BP 385/15;485/20 420;510 BP 460/20;537/45
B/G UV blue 410/15;490/20 430;500 455/20;535/45
B/G/R UV BP 420/30;495/15;570/20 415;510;590 BP 465/20;530/30;640/40
B/R UV green 420/20;530/45 435;565 465/30;615/70
CFP violet / blue BP 436/20 455 BP 480/40
CFP/YFP violet / blue BP 436/12; 500/20 445;515 BP 467/37;545/45
CFP/YFP/DsRed violet / blue BP 436/8;495/12;580/20 445;510;595 BP 460/25;535/35;630/55
CY3/CY5 546 nm
CY3/TRITC 531 nm
CY5 HQ 620/60x Q 660 LP HQ 700/75
D UV / violet BP 355-425 455 LP 470
DAPI/FITC/CY3 400 nm
DHE D 335/20x 365 D 405/40
E4 violet / blue BP 436/7 455 LP 470
Empty system - - - -
Filter system ICR - Pol + MgF - Analyzer
FITC/CY3/CY5
FITC/Texas Red
FI/RH blue BP 490/15;560/25 500;580 BP 525/20;605/30
FURA2 w/o 72100bs HQ 540/50m
GFP blue BP 470/40 500 BP 525/50
GFP CY2 BP 437/30 495 BP 520/35
GFP (Narrowband) D 480/20x 505 D 520/20
G/R blue BP 490/20;575/30 505;600 BP 525/20;635/40
H3 violet / blue BP 420-490 510 LP 515
I3 blue BP 450-490 510 LP 515
JP1 D470/20x 490 D510/20
JP2 D 510/20x 530 D 560/40