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Leica TCS SP5

雷射掃描共軛焦光譜顯微鏡   及 多光子影像系統

系統與技術介紹

Leica TCS SP5 的完成, 是嘗試提供給攀越巔峰的科研人員. 在台灣, 我們是完成東南亞的首套 TCS SP5, 包括 Multi-Photon FLIM system, FCS system, DM 6000 CFS ( 共軛焦多光子系統架設於載物台升降式顯微鏡 ) 安裝使用案例, 此份榮耀, 是我們的驕傲
目前, 生醫領域 ( 包括, 其他研究領域 的科研人員, 對進階的螢光影像應用需求方向有兩大方向 :
方向 1. 有一批人希望在固定樣品或活細胞樣品上, 取得更高解析的多重螢光染劑標定的多彩螢光影像 ( Multi-spectral fluorescence imaging ). 從不同的取樣參數 ( XYZT, Lambda, Intensity, Angle .. etc ), 來做靜態與動態的觀察紀錄.
方向 2. 另有一批科研人員則希望取得更高速的動態反應機制, 做高速動態影像的觀察或光譜上的定量分析 ( 例如, FRAP, FRET, FLIM, FCS.. etc ), 例如螢光離子流的動態反應定量分析, 或, 時間解析達 Pico-second, femto-second 的螢光衰減時間的影像分析 ( Fluorescence Lifetime ).
今天起, 擁有一套 Leica TCS SP5 即可以滿足此兩大方向的需求 ( 高速-高解析 ).

Leica TCS SP5 也是在一個共軛焦掃描器上, 唯一可以同時做 FLIM ( Fluorescence Lifetime ) 及 FCS ( 2 channel Fluorescence Correlation )  或 ON-LINE ROI ( region of Interest ) 的系統. 此外, 也可同時加裝多光子影像系統.

Ultra High Speed Live Cell Imaging and  Ultra High Resolution Morphology 

ALL in ONE !

Leica TCS SP5 是世上唯一的全光譜共軛焦系統.

Leica TCS SP5 共軛焦掃描器可配置標準的 Conventional Scanner ( C ) 或 選配 Tandem Scanner ( Tandem Scanner 包括 Conventional Scanner 及 Resonant Scanner )
Tandem Scanner
Leica TCS SP5 獨家專利設計的 Tandem 掃描器 (選配), 內建兩組 Resonant ( R ) 及 Conventional ( C ) 掃描器, 可切換使用. 具有高解析掃描及高速動態掃描的使用效益.
真正的 single point 掃描, 超高解析的超高速掃描, 多重螢光影像擷像.
取像速率達 250 frame/sec
掃描線頻率範圍 1 Hz - 16 Hz
光點紀錄 ( Spot recording ) - Beam park - 適合 FRAP ( un-caging ) 實驗, 可紀錄瞬間螢光強度動態變化.
在任何掃描速度下, 皆可做全視野旋轉 ( Field rotation ).
 Conventional Scanner ( C ) ResonantScanner ( R )
Max. line frequency 2800 Hz Max. line frequency 16000 Hz
Min. line frequency 1 Hz Min. line frequency 8000 Hz
Scan speed granulation 1400 Scan speed granulation 1
Max. frame rate 512 x 512 5 Hz Max. frame rate 512 x 512 25 Hz
Max. frame rate 512 x 16 25 Hz Max. frame rate 512 x 16 250 Hz
Beam park Yes Beam park No
Max. frame resolution 8192 x 8192 pixels Max. frame resolution 1024 x 1024 pixels
Scan zoom 1.0x - 32x Scan zoom 1.7x - 32x
Panning Yes Panning Yes
Field rotation 200o optical Field rotation 200o optical
Field diameter 21.2 mm Field diameter 14.8 mm
超高解析掃描 - 多重螢光影像擷像 ( Multi-spectral image acquisition ) 超高速掃描掃描器 - 多重動態螢光影像擷像 ( Multi-spectral image acquisition )
Leica TCS SP5 可適用 Leica 全自動微電腦控制數位顯微鏡 ( CS 級 - 共軛焦專用 )
Leica DM 5000 CS / DM 6000 CS Leica DMI 6000 CS

全自動微電腦控制數位顯微鏡, 超高光學解析, 完全由 Leica LAS AF 控制. 從 UV 到 IR 光譜範圍, 皆配合 TCS SP5 做全新的校正設計. 

Super Z galvanometer stage 

共軛焦專用 Z-軸 載物台

獨家設計, 高速光切用, 適用活細胞 3D 影像擷取.
Z-stacking : 1500 µm ( 1.5 mm - 長工作距離 )
XZ-scan : 180 µm ( 10 Hz 掃描速率 )
Parallel stroke ( 高速且穩定的縱深掃描 )
 
全世界唯一的 Leica Lambda-Blue 系列物鏡, 能確保 Co-localization ( Excitation spot and Emission in focal plane ) ,  能確定 Z-registration, 使得 FRET, FRAP, Photoactivation  研究具有正確的意義, 此類物鏡最適宜應用於 :
 UV-Dyes
 CFP, GFP2
 FRET, FRAP
 Photoactivation
 
Leica TCS SP5 是是上 " 唯一 " 真正的全光譜調控式共軛焦系統 !
Leica TCS SP5 擁有 AOTF, AOBS, SP-detector, 

代表真正的全光譜調控式共軛焦系統. 

其可以提供您最高解析的影像輸出, 

最有意義的實驗結果, 最吻合投資使用

效益的系統, 可滿足現在及未來的需求. 

激發雷射光源控制

 ( Excitation )

AOTF 

( Acousto Optical Tunable Filter )

 

 

分光控制 

( Beam Splitter )

AOBS 

( Acousto Optical Beam Splitter )

光譜偵測控制 

( Emission )

Spectral-Photometer 

( SP detector )

AOTF 標準可程式光波調控 ( AOTF, Acousto Optical Tunable Filter, programmable ), 包括紫外光雷射 ( UV 3 channels - 選配 ), 可見光雷射 ( VIS 8 channels ), 紅外光雷射 ( EOM ), 皆採用 AOTF ( EOM IR - 選配 ) 調控雷射光波選取與強度控制.可精確控制光波強度, 避免螢光漂白. 達到最佳多重螢光染劑的激發效果.
AOBS 選配 Leica 獨家專利可程式分光控制, 可同時分光調控 8 channels. 任何螢光的激發光譜與釋放光譜, 皆可精確的分光, 解析可低於 2 nm 寬幅. 使用人員可廣泛使用染劑組合, 使用 AOBS 可將螢光訊號重疊 ( Crosstalk ) 降到最低., 提升螢光偵測訊號, 大幅提高螢光影像的解析.
SP detector TCS SP5 可選配 5 組內建式 Leica 獨家專利 可程式分光光譜感測系統 SP detector, 每一組的光譜範圍廣達400 – 850 nm ( 波幅解析低於 2 nm ) . 此設計替代了傳統的濾鏡及分光鏡. 因為, 光通過濾鏡的數目減少, 其光學穿透有效率更高, 影像更為鮮明, 解析更高. 平均來自樣品的反射螢光到達感測器時, 仍能提供 90% 以上的穿透率, 使用 SP detector 能真正的掌握每一螢光染劑的釋放光譜, 避免螢光交戶重疊 ( crosstalk ), 也避免螢光漂白. 此技術也是唯一可作多重螢光的全光譜感測與呈像
雷射系統

Leica TCS SP5 可以同時使用 UV-VIS-IR 雷射, 激發光譜範圍從 350 nm 到 1050 nm 皆可使用之.

感測光譜範圍為 400 - 800 nm

 

可見光雷射系統

  ( VIS laser configuration )

雷射代號 R O Y G B V
雷射組合 A            
雷射組合 B            
雷射組合 C            
雷射組合 D            
雷射組合 E            
雷射組合 F            
所有可見光雷射皆光纖傳導, 8-channels AOTF 調控. Ar 雷射可選配噪音消除設備.

紫外光雷射系統

( UV laser )

Leica TCS SP5 可以同時使用 Ar-UV 351 nm 雷射 及 DPSS 405 nm near UV 雷射.
Diode UV 雷射, 405 nm, 50 mW
Ar-UV 雷射, 351, 364 nm, 50 mW
FLIM 適用的脈衝雷射, Diode 3 mW, 405 nm Pulsed UV laser.

多光子影像專用 - 紅外光雷射

Ti-Sapphire IR Laser

Multi-Photon Imaging system

可程式操控介面 ( Programmable Control Panel )

最讓人激賞的 即時調控所有操作介面, 可程式化, 讓你專注樣品.

應用軟體 ( Application software )
系統操作軟體架構在全新的 Leica LAS AF 軟體環境下 ( Leica Application Suite - Advanced Fluorescence ). 新的軟體平台可應用於所有 Leica 的顯微鏡及影像系統. 功能完整, 使用簡易, 可讓你 step by step 一步一步依序操作, 任何人只要最基礎的訓練, 即可輕易的上手. 

在最複雜精密的系統設計上, 給與你最簡單輕鬆的使用 !

 

選配應用軟體 :

Leica TCS SP5 提供許多的使用效益 :

 Nr.

Technology-Feature Benefit
1

 

 

 

 
Resonant scanner

 

 

 

 
High speed true confocal
Low bleaching at all speeds
High speed 5 channels
High speed at large field
High speed still with zoom and pan
2

 

 

 

Tandem

 

 

 

Ultimate Flexibility
Broadband Speed
Beam park
Imaging core facilities
3

 

 

 

 
SP-Detector

 

 

 

 
Simultaneously 5 channels
Ultimate Flexibility
Open for future applications
Fluorescence Lifetime Imaging: l-scan
FLIM with tunable bands
4

 

 

 

 

 

 
AOBS

 

 

 

 

 

 
Highest Sensitivity
High speed switching
8 lines visible simultaneously
Tunable
Any combination without Hardware change
Combination of all sources
No disalignment
5

 

APD

 

Highest Sensitivity
No dark noise
6

 

 

 

SuperZ Galvanometer stage

 

 

 

1,5 mm travel range
Full free working distance
No geometrical distortion
10 Hz Speed
7

 

 
Leica LAS interface

 

 
Steep learning curve
No fluctuating interface
8

 

 
8k²

 

 
Overview imaging
No stitiching necessary
full resolution in one single scan
9

 

 
Optical rotation

 

 
Independent of scan speed
Independent of scanner type
No scan-phase distortions
10

 

405nm and UV in one system

 

Flexible excitation
Un-caging by 350nm
11 UV/VIS/IR in one system 10 lines UV, vis and IR
12

 

UV corr. Lenses

 

Individual corrections for 350 resp. 405nm
Correct colocalisation experiments
13 Lambda blue lens Correct co-localisation experiments
14 Glycerol lens High resolution with mounted samples
15

 

online ROI illumination 

 

Any intensity in any Region
Multiple and individual illuminations
16 Flymode Fast response measurement
17 online ROI spectrometer Fast emission tracking
18

 

Leica PMT R9624

 

Highest Sensitivity
Low dark current
19

 

 
FCS/FLIM in one system

 

 
Direct FRET comparison
Lower total investment cost
Imaging core facilities
20

 

FCS via Scanner

 

Reliable FCS location
Stable and economic
21 FCS by visible and MP-laser Flexible and future-oriented
22

 

 
x2y-design

 

 
No vignetting VIS and UV
Correct optical scanning
Best resolution
23

 

MicroLab software

 

Versatile Software for kinetic measurements
Fast acquisition through Wizards
24

 

 

 

LiveDataMode

 

 

 

Full time experiment tracking
Interactive control of parameters
Tailored experiment sequencing
Graphical Macro-inerface
 

 

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美嘉儀器股份有限公司 Major Instruments Co., Ltd.