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histo 鑽石刀介紹

DiATOME histo -系列, 鑽石刀
  • 適用於常溫環境的切片作業, 適用生物組織樣本或工業材料.
  • 提供光學顯微鏡樣本檢視應用
  • 可以取得更薄的切片厚度. 一把鑽石刀, 可以從超薄到半薄的切片厚度.
  • 適宜生物或工業材料樣本, 無論樣本是否包埋, 不同的軟硬程度, 乾溼切片方法, 皆可適用.
  • DiATOME鑽石刀, 在各類超薄切片品質與長時間的耐用性達到最高的使用效益與最佳的平衡設計, 可以無限次數的拋光, 永保新品的切片品質. 其親水性的切削刃保證刀鋒的濕潤, 可做到最高的超薄切片品質.
  • 平行的載片水槽, 可以輕鬆的載片與撈片裱片, 大型水槽適用連續切片
  • 在切片過程中大幅降低樣本壓縮, 保存樣本最完整的結構細節.



DiATOME histo-系列鑽石刀, 擁有下列刀型 :
histo 常規冷凍切片(乾), 適宜生物或工業材料樣本. 超薄或半薄切片, 提供光學顯微鏡檢視應用
histo jumbo 大型水槽, 適用連續切片.
histo cryo  (dry) 常規冷凍切片(乾), 適宜生物或工業材料樣本. 提供光學顯微鏡檢視應用
histo cryo  (wet) 常規冷凍切片(濕), 適宜使用 DMSO/水 的高分子聚合物樣本.

半薄切片, 即光鏡切片，由於其可薄至0.5 – 2 (μm) 微米，故而又稱半薄切片，是電鏡超薄切片技術中一種有效的定位方法。半薄切片（厚度0.6 - 0.8μm）的製備，在如今是一種常用制樣手段。由於半薄切片圖像的清晰度、解析度遠優於石蠟切片，視野也大於超薄切片，所以有利於獲得高質量的光學顯微鏡成像。



















切片提示
 
透射式電子顯微鏡 (TEM) 主要用於觀察細胞內部的細微結構，Cryo TEM 可以進一步探索自然原位的生理結構. 由於 TEM 電子的穿透力較弱，所以電鏡樣本切片，厚度盡可能小於50 nm左右的超薄切片 ( 小於 100 nm )。
 
樣品在進行超薄切片之前，首先要經過固定、脫水和包埋等處理程序，在切片之後還要經過染色等處理才能進行電鏡觀察。
 
超薄切片術是基本的電鏡樣品製備技術，其基本過程同石蠟切片大體相似，包括取材、固定、漂洗、脫水、滲透與聚合、切片和染色等多個環節。但操作過程比石蠟切片更為細緻與複雜。
 
為了獲得理想的超薄切片，實驗者必須認真對待每一個步驟，任何環節的疏忽都可能導致制樣的失敗。合格的超薄切片樣品應該達到以下基本要求：
 
切片的厚度在50 nm左右，不能超過100 nm，以獲得較高的分辨力和較高的反差；
切片應能耐受電子束的強烈照射而不發生破裂、變形；
細胞超微結構保持良好，沒有明顯的物質凝聚和丟失。 
1、取材
活體取材的關鍵是盡可能地迅速和準確。整個取材過程最好在1分鐘內完成並立即投入到固定液中，要注意材料體積要小，否則會影響固定效果。取材時所用的器械最好事先預冷，器械要鋒利、操作時應避免拉、鋸、壓等動作而造成細胞損傷。
 
2、固定
是電鏡樣品製備中極為重要的一環，其目的是利用化學試劑使被研究細胞的精細結構或化學成分保持其生前狀態。良好的固定應使細胞的生命過程立即終止，其中所含的半流質內容物應立即凝固而不瓦解，所有的細胞器都應完整無損地得以保存下來。
 
3、脫水與滲透
 
4、包埋與聚合
包埋的目的是讓樣品組織獲得一定的硬度、彈性和韌性，能夠承受超薄切片時各種力的作用，便於製成超薄切片。
 
5、超薄切片
一般來講，超薄切片的操作要求在防震、恒溫和無空氣流通的環境中進行，因為輕微的震動、溫度變化和氣流等因素均會影響切片效果。
 
6、染色
為了增加超薄切片的反差，以充分顯示組織和細胞的超微結構，一般採用鈾·鉛雙重染色法。即先用醋酸鈾對切片進行初染，再用檸檬酸鉛進行複染。醋酸鈾的主要作用是提高核酸、核蛋白和結締組織纖維成分的反差；而檸檬酸鉛主要是提高細胞膜系統和脂類的反差。






 

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